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二氧化碳培養(yǎng)箱學習以及主要設計參數(shù)

1.二氧化碳培養(yǎng)箱生物學意義

細胞是構成所有活的有機體的基本單位。要想研究細胞的功能、代謝以及細胞對環(huán)境諸因素影響的反應等,需要創(chuàng)造既能使細胞脫離復雜環(huán)境的直接影響,又能維持正常生命活動的環(huán)境條件。二氧化碳培養(yǎng)箱就是這樣一種能使細胞在人工環(huán)境正常生長的科學實驗裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農(nóng)業(yè)科學、藥物學的研究和生產(chǎn),已經(jīng)成為上述*域?qū)嶒炇?*普遍使用的常規(guī)儀器之一,其通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞 / 組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如恒定的酸堿度(p H 值:7 . 2 - 7 . 4 )、穩(wěn)定的溫度(3 7 ℃)、較高的相對濕度(9 5 % )、穩(wěn)定的水平(5 % ),來對細胞 / 組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。
用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條**基本的要求:一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟取⒍趸紳舛群蜐穸忍峁?*精確穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。

2.二氧化碳培養(yǎng)箱的原理

二氧化碳培養(yǎng)箱主要包含以下幾個方面功能:溫度控制系統(tǒng)、二氧化碳濃度控制系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)、放污染設計和滅菌系統(tǒng)。這四大基本功能決定了二氧化碳培養(yǎng)箱性能優(yōu)越。
2.1  溫度控制
培養(yǎng)箱的加熱方式分為氣套式加熱和水套式加熱。水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的,當遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定時間是氣套式系統(tǒng)的3-4倍),有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件的用戶選用。氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關的培養(yǎng)。
保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素,因此精確可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱不可或缺的重要部分。為了使培養(yǎng)箱更加穩(wěn)定的工作,箱內(nèi)溫度控制、超溫報警控制和環(huán)境溫度監(jiān)控三重獨立的溫度控制功能必不可少。
配備風扇以及風道的培養(yǎng)箱內(nèi)部的溫度均一度較好,同時此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、濃度和相對濕度的迅速恢復。
2.2 二氧化碳濃度控制
   二氧化碳濃度測定目前市場上有兩種方法:紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TCD)。熱導傳感器監(jiān)控濃度的工作原理是基于對內(nèi)腔空氣熱導率的連續(xù)測量,輸入氣體的熱導率會使腔內(nèi)空氣的熱導率發(fā)生變化,這樣就會產(chǎn)生一個濃度直接成正比的電信號。紅外傳感器(IR)它是通過一個光學傳感器來檢測水平的。IR 系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器,當箱體內(nèi)的吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內(nèi)的水平,從而可以得出箱體內(nèi)的濃度。由于 IR 系統(tǒng)是通過紅外線減少來確定箱內(nèi)濃度,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR 系統(tǒng)對箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感,因此 IR 傳感器應用在含 HEPA 高效空氣過濾器的培養(yǎng)箱內(nèi)比較合適。
無論哪種測量系統(tǒng)在使用一段時間后都會產(chǎn)生漂移,而產(chǎn)生漂移后直接會導致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在設定值,致使培養(yǎng)失敗。故,帶有測量系統(tǒng)自動校準功能的培養(yǎng)箱是很有必要的。
2.3 相對濕度
箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達 95% 左右,但開門后濕度恢復速度很慢)。
2.4 防輻射設計和滅菌系統(tǒng)
污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,相繼問世了多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能的 C O2培養(yǎng)箱;還有的設計生產(chǎn)了 HEPA 過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去 99.97% 的 0.3 微米以上的顆粒;此外,還開發(fā)設計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。

3.三洋二氧化碳培養(yǎng)箱主要參數(shù)

加熱方式 DHA方式 (直接加熱氣套式)
箱內(nèi)循環(huán)方式 微風攪拌方式
溫度調(diào)節(jié)方式 PID控制方式
溫度控制范圍 +5℃~50℃ (環(huán)境溫度:5℃~35℃)
溫度均勻性 ±0.25℃(環(huán)境溫度25℃,設定37℃,二氧化碳5%,無負載)
溫度波動幅度 ±0.1℃(環(huán)境溫度25℃,設定37℃,二氧化碳5%,無負載)
二氧化碳控制方式 開關控制方式 (TC傳感器)
二氧化碳濃度控制范圍 0~20%
加濕方式 加濕托盤自然蒸發(fā)方式
箱內(nèi)濕度 95±5%R.H.
UV殺菌紫外燈 4W無臭氧型 (選配)
水位感應器 光學反射檢測法
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